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大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒的實驗原理
基于雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)技術(shù)，具體流程如下：
固相抗體包被?
微孔板預(yù)先包被抗VEGF-C單克隆抗體，形成固相捕獲抗體?。
抗原-抗體結(jié)合?
加入待測樣本(如血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清)，樣本中的VEGF-C與固相抗體特異性結(jié)合，形成“固相抗體-VEGF-C"復(fù)合物?。
酶標抗體反應(yīng)?
加入生物素標記的抗VEGF-C多克隆抗體(檢測抗體)，與已結(jié)合的VEGF-C結(jié)合，形成“固相抗體-VEGF-C-酶標抗體"夾心結(jié)構(gòu)?。
信號檢測?
洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后，加入過氧化物酶標記的親和素(鏈霉親和素-HRP)?。
加入底物TMB(四甲基聯(lián)苯胺)，HRP催化TMB顯色(藍色→黃色)，顏色深淺與VEGF-C濃度成正比?。
酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣本濃度?。
關(guān)鍵特性?：
檢測范圍通常為15.6–1000pg/ml?。
特異性針對VEGF-C亞型(，避免與其他VEGF家族成員交叉反應(yīng)?。
適用于科研實驗
注意事項?：
樣本需避免反復(fù)凍融，血清/血漿樣本需使用無熱原試管收集?。
實驗重復(fù)性要求板內(nèi)變異系數(shù)<10%，板間<15%?。
注：僅供科研使用，以上資料供參考，如需具體產(chǎn)品說明請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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