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ELISA避免“花板"出現(xiàn)的措施之陰陽性對照的選擇
ELISA實驗是一種靈敏度高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法，ELISA實驗中有很多因素影響著實驗結(jié)果，導致出現(xiàn)“花板"問題。為了避免“花板"問題的出現(xiàn)，降低檢測的假陽性率，獲得更理想的實驗結(jié)果，BUNSEN本生技術(shù)小編建議：先我們在選擇ELISA試劑時，應選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、價格操作方便、省時的試劑。并在檢驗的過程中應采取下列措施:
(1)檢測之前，加大離心轉(zhuǎn)速，盡量延長時間，使血細胞和纖維蛋白充分沉淀，讓血細胞與血清分離。
(2)抽取樣本時應抽出足夠檢驗量的血液標本，選擇無添加劑的真空試管。
(3)血液標本應置于室溫下1～2h，使血液凝固收縮，然后離心檢測或讓血液過夜后再檢測。這樣才能使得血液充分收縮，讓標本中的非特異性物質(zhì)所致的假陽性率降至低。
(4)加樣時不能加入紅細胞或纖維蛋白，要按照操作說明書去做，否則會影響實驗結(jié)果。
(5)封板溫育時，各孔一定要封嚴，防止陽性標本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導致“花板"的出現(xiàn)。
(6)手工洗板時應注意液體被濺出或孔與孔之間的液體溢出，連成整體液面后產(chǎn)生“花板"。
(7)洗液的溫度也會影響洗板的干凈程度，尤其是冬天溫度過低時容易出現(xiàn)“花板"問題。
(8)用洗板機洗板時應防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導致“花板"的出現(xiàn)。
Elisa試劑盒之陰陽性對照的選擇：
做ELSIA實驗時，會遇到很多問題，ELISA實驗中最常見問題的就是陰陽性對照應該如何選擇。
1、如何選擇合適的陽性對照?
陽性對照的基本組成應該盡量與檢測樣本的組成一致，一般陽性對照多以含蛋白保護劑的緩沖液為基質(zhì)，加入一定量的待檢物質(zhì)。比如，以人血清為標本的測定，陽性對照多用確定的病人血清或者以復鈣人血漿為原料加入一定量標準品。
2、如何選擇合適的陰性對照?
陰性對照的基本組成也應該盡量與檢測樣本的組成一致，先檢測確定其中不含待檢物質(zhì)。比如，檢測人血清標本時，陰性對照應該選擇正常人血清。檢測免疫動物血清中抗體效價時，陰性對照應該選擇該動物的免疫前血清。
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